ITC测试须知
1. 样品体积(一次实验所需):注射器(分子量较小的物质,例如:DNA、金属离子、多肽等)为60μL,样品池(分子量较大的物质,例如:蛋白、络合剂等)为360μL。
2. 样品浓度:注射器内物质的浓度是样品池中的10~20倍(若是浓度太高,形成曲线会非常陡);浓度尽可能确切,否则计算的常熟值会不准确;样品池的浓度和所要测KD(亲和力)值相关,一般是KD值的10~40倍(不同实验需摸索条件)
3. (重要)样品池和注射器中的样品缓冲液成分要尽可能完全相同,包括成分和pH值:pH值相差不超过0.05pH单位。最好是两种溶液在同样的buffer中充分透析以达到完全的化学平衡。
4. 尽量不要使用还原剂,如果必须使用,可选用TCEP和β-巯基乙醇,不要使用DTT。如果必须使用DTT,请在进行ITC实验前,将其透析完全,DTT会对样品池内涂层材料产生影响。
ITC收费细则
1. 每个样品测试成功收取测试费用为100元;
2. 由于样品问题,测试失败,收取测试费用的50%;
3. 由于仪器问题,测试失败,不收取费用;
4. 测试费用校内现金转账,暂时不收取机时票。